可见分光光度计是一种高效、准确的分析仪器，其在定性和定量分析中发挥着不可替代的作用。通过正确的操作、维护和校准，可确保其长期稳定运行，为我们的检验检测提供可靠数据支持。
一、仪器原理
可见分光光度计利用光在物质中的吸收原理，通过测量样品在一定波长下的吸光度（A）或透过率（T），用于定量分析物质的浓度或性质。
二、操作前的准备工作
1. 环境与仪器检查
1.1环境要求
仪器应放置在宽敞、通风、无振动的实验室环境中，避免强光照射。实验室温度和湿度应符合仪器说明书的要求。
1.2光源检查
确认光源灯（如钨灯或卤素灯）正常工作，无频闪、异常亮度或灯寿问题。
1.3 比色皿检查
选择合适的比色皿（石英比色皿用于紫外范围；玻璃或塑料比色皿用于可见光范围，避免波长过短）。检查比色皿是否有划痕、污渍或气泡。
2. 样品与溶剂准备
2.1空白液准备
空白液通常为实验中用作溶解样品的溶剂。例如测定甲醛含量时可用去离子水作为空白液。
2.2样品准备
样品必须澄清透明，无悬浮物或沉淀。如果样品浑浊，需先过滤或离心处理。例如需测定0.5 mg/mL甲醛溶液的浓度，空白液可以是水，样品为制备好的甲醛溶液。
三、操作步骤
1. 仪器开机和预热
1.1打开电源，将仪器预热10-30分钟，确保光源和电子系统稳定运行。
1.2设置仪器模式为“吸光度（Absorbance）”或“透过率（Transmittance）”，根据实验需要选择。
2. 波长设置
2.1根据实验要求设置波长，如甲基橙溶液，波长为465 nm。
2.2有些仪器支持自动波长调整，可直接输入目标波长；如是手动调节型仪器，需通过旋钮精准调整。
3. 校零（空白校准）
3.1将空白液注入比色皿（填充至比色皿高度的2/3），确保无气泡。用镜头纸擦拭干净比色皿的光滑表面。
3.2放入比色槽，关闭盖子，按“校零”或“空白”按钮，将吸光度调至0（透过率调至100%）。
注意：比色皿通常有光滑面和磨砂面，光滑面应与光路对齐。
4. 样品测试
4.1用干净的比色皿装入样品（同样填充至2/3高度），擦拭外壁干净，放入比色槽。
4.2关闭盖子，按“测量”键读取吸光度值。
4.3记录数据
记录所测吸光度值（如0.376, 0.512等），并注意波长条件。假设测定甲醛溶液时，550 nm处读数为0.425。根据标准曲线可得出甲基橙浓度为0.35 mg/L。
5. 多样品测量
5.1逐一用新样品替换比色皿中的液体，重复上述步骤。
5.2在每次更换样品前，建议用空白液重新校零，确保数据准确性。
四、测量完毕后的收尾工作
1. 处理样品与比色皿
1.1 倾倒样品液体，使用蒸馏水或去离子水清洗比色皿3次，晾干后妥善放置。
1.2对有机溶剂（如乙醇、氯仿）样品，需根据化学性质使用适当溶剂清洗。
2. 数据保存
将实验数据记录在实验表格中，包括样品编号、波长、吸光度值等。若仪器支持数据导出，将数据导入电脑保存。
3. 仪器关机
3.1按操作规程关闭仪器电源，并待光源冷却后拔掉电源插头。
3.2盖上防尘罩，保持仪器整洁，避免灰尘进入比色槽。
五、注意事项
1. 样品安全
操作有毒、有机挥发性样品时，请在通风橱内完成。
2. 电气安全
确保电源接地良好，避免因触电或电压不稳导致仪器损坏。
3. 仪器维护
定期检查光源灯的寿命，并按设备要求及时更换（如卤素灯通常寿命为2000小时）。
4.使用时请尽量避免用硬物触碰仪器光学部件，以免影响精度。
六、常见问题及解决
1. 问题：吸光度波动较大
- 原因：比色皿内有气泡或样品不均匀。
- 解决方法：轻轻震荡样品；重新装液体，确保无气泡。
2. 问题：无法校零
- 原因：空白液中有杂质或光源老化。
- 解决方法：检查空白液纯度，或联系技术人员更换光源。
3. 问题：吸光度超限（>3.0）
- 原因：样品浓度过高，光透过率太低。
- 解决方法：稀释样品至适当浓度后重新测量。假设原样品吸光度为3.2且线性范围为0-1.5，可稀释样品10倍测得0.32，最后乘以稀释倍数还原浓度。
创作不易，如果您认为对您有帮助，欢迎大家打赏、点赞、转发和订阅，您的鼓励激励我创作出更多有价值内容。
精选推荐：
