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生物实验的方法(12/30)

生物实验的方法

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生物实验的方法-生物的实验方法有哪些

      (1)显微观察法,如观察植物细胞有丝分裂、观察叶绿体和细胞质流动、观察植物细胞质壁分离和复原实验等。

      (2)观色法,如观察动物毛色和植物花色的遗传等。

      (3)原子示综法,如噬菌体浸染细菌的实验,用18O2和14CO2追踪光合作用中氧原子和碳原子转移途径的实验等。

      (4)等组实验法,如小麦淀粉酶催化淀粉水解的实验,发现生长素的燕麦胚芽鞘实验等。

      (5)加法创意法,如用饲喂法研究甲状腺激素,用注射法研究动物胰岛素和生长激素,用移植法研究性激素等。

      (6)减法创意法,如用阉割法、摘除法研究性激素、甲状腺激素和生长激素的实验,雌蕊受粉后除去正在发育着的种子等。

      (7)杂交实验法,如孟德尔发现遗传定律的植物杂交、测交的实验,小麦的杂交等。

      (8)化学分析法,如番茄和水稻对Ca和Si选择性吸收,叶绿体中色素的提取和分离实验等。

      (9)理论分析法,如大、小两种草履虫竞争的实验,植物根向地生长、茎背地生长的实验,植物向光性实验等。

      (10)模拟实验法,如渗透作用的实验装置,分离定律的模拟实验等

生物实验的方法-高中生物常用的实验方法有哪些?

      1.实验方法

      实验方法是整个实验设计的精髓,是做好实验设计的关键所在。现将与中学实验有关的一些最常见的经典的实验方法汇总:

      (1)化学物质的检测方法:

      ①淀粉——碘液

      ②还原糖——斐林试剂、班氏试剂

      ③CO2——Ca(OH)2溶液或酸碱指示剂

      ④乳酸——pH试纸

      ⑤O2——余烬复燃

      ⑥无O2——火焰熄灭

      ⑦蛋白质——双缩脲试剂

      ⑧染色体——龙胆紫、醋酸洋红溶液

      ⑨DNA——二苯胺试剂

      ⑩脂肪——苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液

      (2)实验结果的显示方法:

      ①光合速率——O2释放量或CO2吸收量或淀粉产生量

      ②呼吸速率——O2吸收量或CO2释放量或淀粉减少量

      ③原子途径——放射性同位素示踪法

      ④细胞液浓度大小——质壁分离

      ⑤细胞是否死亡——质壁分离

      ⑥甲状腺激素作用——动物耗氧量,发育速度等

      ⑦生长激素作用——生长速度(体重变化,身高变化)

      ⑧胰岛素作用——动物活动状态

      ⑨菌量——菌落数或亚甲基蓝溶液褪色程度

      ⑩大肠杆菌——伊红—美蓝琼脂培养基

      (3)实验条件的控制方法:

      ①增加水中氧气——泵入空气或吹气或放入绿色植物

      ②减少水中氧气——容器密封或油膜覆盖或用凉开水

      ③除去容器中CO2——NaOH溶液

      ④除去叶片中原有淀粉——置于黑暗环境

      ⑤除去叶片中叶绿素——酒精隔水加热

      ⑥除去光合作用对呼吸作用的干扰——给植株遮光

      ⑦如何得到单色光——棱镜色散或彩色薄膜滤光

      ⑧血液抗凝——加入柠檬酸钠

      ⑨线粒体提取——细胞匀浆离心

      ⑩骨的脱钙——盐酸溶液

      ⑾灭菌方法——微生物培养的关键在于灭菌,对不同材料,灭菌方法不同:培养基用高压蒸气灭菌;接种环用火焰灼烧灭菌;双手用肥皂洗净,擦干后用75%酒精消毒;整个接种过程都在实验室无菌区进行。

      (4)实验中控制温度的方法:

      ①还原糖鉴定:水浴煮沸加热

      ②酶促反应:水浴保温

      ③用酒精溶解叶中的叶绿素:酒精要隔水加热

      ④DNA的鉴定:水浴煮沸加热

      ⑤细胞和组织培养以及微生物培养:恒温培养

      2.斐林试剂、班氏试剂与尿糖试纸

      这三种物质均可用来检验含醛基的有机物的存在,在医学上用来检验糖尿病,其原理均是利用了Cu2+的氧化性把醛基氧化,但成分略有不同:

      斐林试剂:即硫酸铜、氢氧化钠和酒石酸钾钠组成的蓝色混合溶液。分为斐林试剂A和斐林试剂B,A为CuSO4溶液,B为氢氧化钠和酒石酸钾钠的混合溶液,使用时将A、B等体积混合即成斐林试剂。

      班氏试剂:即硫酸铜、碳酸钠和柠檬酸钠组成的混合液,又叫本尼迪克特(Benedict)试剂,它与醛反应的结果是与斐林试剂一致的,只是比斐林试剂更稳定,所以在临床化验中更常使用。

      尿糖试纸:又叫硫酸铜试纸,呈白色,带蓝色斑点,用于糖尿病患者的尿糖测试。每片含硫酸铜20毫克,枸橼酸300毫克,碳酸钠80毫克,氢氧化钠235毫克。尿糖试纸法快速、方便,试纸的正确使用方法为:将试纸条放在尿液中浸湿,一秒钟后取出,在一分钟内观察试纸的颜色,并与标准色板对照,

      双缩脲试剂B为0.01g/mLCuSO4溶液。

      ②配制比例不一样。

      ③使用方法不一样:斐林试剂是甲、乙液一起混合后再使用,

      双缩脲试剂则是先向待鉴定材料加入A试剂摇匀后,再加入试剂B。

      ④鉴定的对象不一样:斐林试剂鉴定的是还原糖,双缩脲试剂鉴定的是蛋白质。

      ⑤反应本质及颜色反应不一样。

      4.苏丹Ⅲ染液与苏丹Ⅳ染液的比较

      都是用来鉴定脂肪。苏丹Ⅳ染液更易溶于脂肪,所以染色更深,同时要求染色时间更短。

      生物学中常用的试剂:

      1、斐林试剂: 成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液)。用法:将斐林试剂甲液和乙液等体积混合,再将混合后的斐林试剂倒入待测液,水浴加热或直接加热,如待测液中存在还原糖,则呈砖红色。

      2、班氏糖定性试剂:为蓝色溶液。和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。用于尿糖的测定。

      3、双缩脲试剂:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO4(乙液)。用法:向待测液中先加入2ml甲液,摇匀,再向其中加入3~4滴乙液,摇匀。如待测中存在蛋白质,则呈现紫色。

      4、苏丹Ⅲ:用法:取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中,摇匀。用于检测脂肪。可将脂肪染成橘...(被苏丹Ⅳ染成红色)。

      5、二苯胺:用于鉴定DNA。DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色。

      6、甲基绿:用于鉴定DNA。DNA遇甲基绿(常温)会被染成蓝绿色。(甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。)

      7、50%的酒精溶液:在脂肪鉴定中,用苏丹Ⅲ染液染色,再用50%的酒精溶液洗去浮色。

      8、75%的酒精溶液:用于杀菌消毒,75%的酒精能渗入细胞内,使蛋白质凝固变性。低于这个浓度,酒精的渗透脱水作用减弱,杀菌力不强;而高于这个浓度,则会使细菌表面蛋白质迅速脱水,凝固成膜,妨碍酒精透入,削弱杀菌能力。75%的酒精溶液常用于手术前、打针、换药、针灸前皮肤脱碘消毒以及机械消毒等。

      9、95%的酒精溶液:冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝集DNA。

      10、15%的盐酸:和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖。

      11、龙胆紫溶液:(浓度为0.01g/ml或0.02g/ml)用于染色体着色,可将染色体染成紫色,通常染色3~5分钟。(也可以用醋酸洋红染色)

      12、20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁:用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。(新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶)

      13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液:用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。

      14、碘液:用于鉴定淀粉的存在。遇淀粉变蓝。

      15、丙酮:用于提取叶绿体中的色素。

      16、层析液:(成分:20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成,也可用93号汽油)可用于色素的层析,即将色素在滤纸上分离开。

      17、二氧化硅:在色素的提取的分离实验中研磨绿色叶片时加入,可使研磨充分。

      18、碳酸钙:研磨绿色叶片时加入,可中和有机酸,防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏。

      19、0.3g/mL的蔗糖溶液:相当于30%的蔗糖溶液,比植物细胞液的浓度大,可用于质壁分离实验。

      20、0.1g/mL的柠檬酸钠溶液:与鸡血混合,防凝血。

      21、氯化钠溶液:①可用于溶解DNA。当氯化钠浓度为2mol/L、 0.015mol/L时DNA的溶解度最高,在氯化钠浓度为0.14 mol/L时,DNA溶解度最低。②浓度为0.9%时可作为生理盐水。

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